Современные биохимические тест-полоски для клинических исследований мочи в клинико-диагностических лабораториях
|
|
ЛЕЙКОЦИТЫ Лейкоциты - бесцветные мелкозернистые клетки круглой формы в 1,5 - 2,0 раза больше неизмененного эритроцита. В моче обычно содержатся нейтрофилы. При низкой осмоляльности и щелочной реакции (рН 8,0 - 9,0) лейкоциты увеличиваются в размерах, разбухают, в цитоплазме обнаруживается броуновское движение нейтрофильных гранул. При длительном нахождении в моче, содержащей бактерии, нейтрофилы разрушаются. Эозинофилы отличаются от нейтрофилов содержанием в цитоплазме характерной зернистости сферической формы, желтого цвета, резко преломляющей свет. Лимфоциты диагностируются в моче только в препаратах, окрашенных азур-эозином. В норме в 1 мкл утренней порции мочи содержится до 40 лейкоцитов. При ориентировочном изучении осадка мочи у мужчин в норме обнаруживается 0-2 , у женщин до 4-6 лейкоцитов в поле зрения. Дифференциацию лейкоцитов в окрашенных препаратах мочи ("Мочевая лейкоцитарная формула") проводят микроскопией (окуляр 10Х, объектив 90Х) 200 лейкоцитов, выражая количество разных форм в процентах. Клинические аспекты. Пиурия (лейкоцитурия), является наиболее характерным симптомом инфекционно-воспалительного процесса в почках и мочевых путях. Для хронических и неинфекционных воспалений характерна лейкоцитурия более чем бактериурия, которая в этих случаях нехарактерна. Лейкоцитурия чаще наблюдается у женщин, чем у мужчин, это связано с большим числом заболеваний мочевого тракта и высокой вероятностью загрязнения мочи лейкоцитами вагинального секрета. Лейкоцитурия и бактериурия характерны для острого и хронического пиелонефрита. Особенно это важно при диагностике хронического пиелонефрита, который протекает часто без выраженных клинических признаков. Лейкоцитурия основной симптом воспалительных заболеваний мочевых путей (пиелит, цистит, уретрит). Она возможна при врожденных и приобретенных нарушениях оттока мочи, в том числе при структурных аномалиях и мочекаменной болезни. Различные формы "безбактериальной" лейкоцитурии могут быть связаны с инфекцией мочевых путей, при которой использовалась антибактериальная терапия широкого спектра действия с лекарственными нефропатией, гломерулопатией и интоксикацией (аналгетики, седативные средства), с инфекциями, вызванными микроорганизмами и простейшими (трихомонады, гонококки, микоплазмы, вирусы или грибы). Неинфекционная лейкоцитурия может быть связана с опухолевым процессом, туберкулезом почек и мочевых путей. Лимфоцитурия характерна для заболеваний почек иммунного генеза: хронический гломерулонефрит, волчаночный нефрит, поздняя стадия хронического лимфолейкоза. Эозинофилы появляются в моче при хроническом пиелонефрите туберкулезного генеза, пиелонефрите, цистите уретрите аллергической этиологии. Принцип теста В настоящее время, у всех производителей тест-полосок (Bayer (Мультискикс), Roche (Комбур-Тест), Биосенсор АН (Уриполиан-XN), Macromed (Макромед), DFI (Сайбоу), Плива-Лахема (Иктофан, Пентафан), YD Diagnostic (Урискан), IND Diagnostic (IND), Macherey-Nagel (Меди-Тест), Dirui (Уристик), Analyticon Biotechnologies (Комби скрин) реакция основана на определении эстераз, находящихся в гранулоцитах. Эстеразы разлагают реагент, субструктура которого вступает в реакцию с солью диазония, что приводит к образованию окрашенного соединения сиреневой окраски. Специфичность и чувствительность Реакционная зона тест-полосок высокочувствительна к наличию лейкоцитов. Чувствительность составляет 10-25 лейкоцитов в микро литре. Изменение цвета реакционной зоны при значениях до 17 лейкоцитов/мкл трудно однозначно оценить, но, как правило, это изменение можно увидеть через 2 минуты инкубации тест-полоски. Именно по этой реакционной зоне лимитируется скорость определения всех 11 параметров мочи таст-полосок, так как реакционную зону на лейкоциты необходимо сравнивать с цветовой шкалой через 2 минуты. Влияние посторонних факторов Наличие в моче бактерий, трихомонад и эритроцитов могут оказывать влияние на реакцию. Наличие формальдегида и лечение имифенемом, мерофенемом и клавулановой кислотой могут привести к ложноположительным результатам анализа. При выраженной окраски мочи (вследствие присутствия билирубина или нитрофуранов) возможно более интенсивное окрашивание реагентной зоны теста из-за наложения цветов. Возможно уменьшения интенсивности окраски реагентной зоны при наличии белка свыше 5,0 г/л или глюкозы свыше 112,0 ммоль/л, а также под действием цефалекисина и гентамицина при приеме высоких суточных доз. Оценка теста Положительным результат теста считается в том случае, если меняется цвет реакционной зоны. В присутствии лейкоцитов исходный кремовый (или сероватый, зависит от производителя) цвет переходит в разные оттенки и интенсивность сиреневого цвета. Интенсивность появляющейся окраски сравнивается с цветной шкалой на упаковке. Если цвет реагентной зоны оказывается промежуточным между двумя квадратами шкалы, то результат определяется по наиболее близкой по окраске цветной зоне шкалы или средним значением между цветовыми квадратами. Пример цветовых шкал различных фирм-производителей:
neg 10-25 75 500 лейкоцитов/мкл
neg 10-25
75
500
лейкоцитов/мкл
|
Экспресс-диагностика diatest@diatest.ru 1995
|